生物低溫制冷設備(如超低溫冰箱、液氮罐、冷凍干燥機等)在生物樣本保存、藥物研發等領域應用廣泛,其安全操作需嚴格遵循規范,以防止設備故障、樣本損壞或人員傷害。以下是詳細的安全操作方法:
一、操作前準備
環境檢查
通風要求:設備需放置在通風良好的區域,避免密閉空間(如液氮罐需防止氮氣積聚導致窒息)。
溫度與濕度:環境溫度宜在10-30℃之間,濕度≤80%,遠離熱源(如陽光直射、加熱器)和腐蝕性氣體。
地面平整性:設備需放置在穩固、水平的地面,防止傾斜導致制冷劑泄漏或機械故障。
設備檢查
外觀檢查:確認設備無破損、變形或泄漏痕跡(如液氮罐外壁結霜異常可能提示真空層損壞)。
電源與接地:檢查電源線是否完好,接地線是否可靠連接,避免漏電風險。
配件完整性:確保配件(如溫度探頭、液氮罐頸塞、冷凍干燥機冷阱)齊全且功能正常。
個人防護
防護裝備:操作液氮罐時需佩戴防凍手套、護目鏡和實驗服;處理超低溫樣本時需使用防凍鑷子、托盤。
培訓要求:操作人員需經過專業培訓,熟悉設備原理、應急流程及安全警示標識。
二、操作中規范
溫度設置與監控
設定溫度:根據樣本需求設定目標溫度(如超低溫冰箱通常設為-80℃),避免頻繁調整導致壓縮機過載。
實時監測:通過內置顯示屏或外部監控系統持續觀察溫度變化,異常波動(如±5℃以上)需立即排查。
溫度記錄:定期記錄溫度數據(如每2小時一次),建立溫度日志以便追溯。
樣本存取操作
快速存取:超低溫設備開門時間應控制在1分鐘內,減少冷量流失;液氮罐取樣時需使用專用提籃,避免直接接觸液氮。
分層存放:樣本按類型、保存期限分層存放,避免頻繁移動導致溫度波動;重物勿放置在設備頂部。
標簽管理:樣本容器需標注名稱、日期、溫度要求,防止誤用或過期。
液氮罐專項操作
充裝規范:液氮充裝量不得超過罐體容積的80%,防止膨脹壓力過高;充裝時需佩戴防護面罩,避免液氮飛濺。
頸塞使用:液氮罐頸塞需保持半開狀態(或使用透氣型頸塞),防止氮氣積聚導致壓力升高。
液位監測:每周檢查液位,液位低于20%時需及時補充,避免樣本暴露于常溫。
冷凍干燥機操作
預凍階段:樣品需預先冷凍至-40℃以下,再放入冷阱,防止冰晶損壞樣品結構。
真空控制:抽真空時需緩慢開啟閥門,避免壓力驟變導致玻璃器皿破裂;真空度穩定后關閉旁通閥。
結束處理:干燥完成后,先釋放真空再打開艙門,防止樣品吸潮。
三、維護與保養
日常清潔
內部清潔:每月用中性清潔劑擦拭內壁,避免使用腐蝕性溶劑;液氮罐需定期清除頸口冰霜。
外部清潔:保持設備表面干燥,防止水漬滲入電路系統。
定期維護
壓縮機檢查:超低溫冰箱每半年檢查壓縮機運行狀態,清理冷凝器灰塵(需斷電操作)。
真空層檢測:液氮罐每年進行真空度檢測,真空值低于10?²Pa需返廠維修。
密封性測試:冷凍干燥機門封條需定期檢查,防止漏氣影響干燥效率。
校準與驗證
溫度校準:每年委托專業機構校準溫度傳感器,確保顯示值與實際值誤差≤±1℃。
性能驗證:通過標準樣品(如已知熔點的物質)驗證設備制冷性能,確保符合要求。
四、應急處理
溫度異常
超溫報警:立即檢查門封是否嚴密、樣本是否堵塞風道;若溫度持續上升,轉移樣本至備用設備。
低溫報警:檢查制冷系統是否過載,適當調高設定溫度(需在樣本允許范圍內)。
液氮泄漏
緊急疏散:迅速撤離泄漏區域,關閉液氮罐閥門;若泄漏量大,啟動通風系統并上報安全部門。
防護措施:處理泄漏時需佩戴自給式呼吸器(SCBA),避免吸入氮氣導致窒息。
設備故障
斷電處理:超低溫冰箱斷電后,門封條用膠帶密封,減少冷量流失;液氮罐需保持頸塞半開狀態。
專業維修:非專業人員勿拆卸設備,聯系廠家或授權維修商處理故障。
五、安全警示與培訓
警示標識
設備表面需張貼“低溫危險”“禁止觸摸”“液氮窒息風險”等警示標識。
液氮罐存放區需設置“禁止煙火”“通風良好”標識。
培訓內容
包括設備原理、操作流程、應急預案、個人防護裝備使用等。
定期組織安全演練(如液氮泄漏模擬演練),提升應急響應能力。
六、合規與記錄
合規要求
符合《實驗室生物安全通用要求》(GB19489)及設備制造商的安全指南。
液氮罐需符合《移動式真空絕熱深冷壓力容器》(GB/T18442)標準。
記錄管理
建立設備使用檔案,包括溫度日志、維護記錄、校準證書等,保存期限≥5年。